Вирус гепатита С, РНК HCV генотипирование (типы 1а, 1b, 2, 3, 4)

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Проведение ПЦР при гепатите C

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

  • анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
  • подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
  • данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

  • качественный и количественный анализы на гепатит С;
  • генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

  • присутствует – говорит об активном размножении вируса;
  • отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

  • инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
  • выбор тактики терапии;
  • продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от до МЕ/мл. Результаты от МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Пример результатов количественного ПЦР-анализа на гепатит С

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

Описание

Вирус гепатита С, HCV ПЦР real-time генотипирование (типы 1а, 1b, 2, 3, 4) — определение вируса гепатита С в сыворотке крови и определение генотипов ВГС 1а, 1b, 2, 3, 4 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичного для данного возбудителя участка ДНК. С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства. Вирус гепатита С Исследование позволяет выявить присутствие РНК вируса гепатита С (субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3) и идентифицировать генотипы 1a, 1b, 2, 3 (субтипы a/b). Вирус гепатита С (ВГС) поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты). Вирус гепатита С подразделяют на 6 генотипов, каждый из которых, в свою очередь подразделяется на субтипы. Генотипы 1, 2 и 3 являются самыми распространенными в мире. В Российской Федерации чаще распространен генотип 1b, чем 1a, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2. Генотипирование вируса гепатита С Генотип вируса гепатита С является наиболее важным фактором, от которого зависит эффективность и тактика противовирусного лечения хронического гепатита С. Знание генотипа вируса используется для планирования продолжительности курса лечения, что особенно важно, учитывая широкий спектр побочных действий применяемых препаратов интерферона и плохую переносимость терапии многими пациентами. Генотипирование вируса гепатита C должно выполняться всем пациентам до начала противовирусной терапии, в целях планирования ее продолжительности, прогнозирования эффективности, в отдельных случаях — для расчета дозы противовирусных препаратов. Основной путь передачи вируса гепатита С — кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже — заражение половым путём. Острый вирусный гепатит Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остаётся невыявленным. У 60–85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печёночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы. Лечение при различных генотипах вируса гепатита С Генотип 1 хуже поддаётся лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлён до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови (< 50 МЕ/мл за 4 недели), вероятен более короткий срок терапии. Если количество вирусных копий не снизилось на 2 порядка за 12 недель, значит, лечение неэффективно и его необходимо пересмотреть. Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80% случаев. Показания При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии. Подготовка Кровь необходимо сдавать утром с –, спустя 2–4 часа после последнего приёма пищи. Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки. Интерпретация результатов Форма представления результата:

  • обнаружена РНК вируса гепатита С, с указанием субтипа — выдаётся в случае обнаружения у пациента присутствия РНК ВГС и возможности её типирования;
  • обнаружена РНК вируса гепатита С — выдается в случае обнаружения у пациента присутствия РНК ВГС, которую нельзя отнести к генотипам 1, 2, 3 или 4;
  • не обнаружено — РНК вируса гепатита С не выявлена или концентрация возбудителя ниже предела чувствительности метода.

Гепатит С: что нужно знать пациенту

Гепатит С — один из самых коварных и смертельных вирусов. В 90% случаев протекают бессимптомно. Из-за способности маскировать истинную причину под видом множества других заболеваний, его прозвали «ласковый убийца». Если болезнь все-таки дала о себе знать, активная ее фаза делится на два основных периода: преджелтушный и желтушный. В первом (раннем) периоде отмечаются такие характерные для вирусных инфекций симптомы, как:

  • общая слабость;
  • кожный зуд;
  • расстройства пищеварения: тошнота, рвота, диарея;
  • повышение температуры тела до 38°С;
  • головные боли, миалгия, артралгия.

На втором (желтушном) периоде, когда поражена печень, в кровь выбрасывает большое количество билирубина — желтого пигмента. Именно благодаря иктеричному окрашиванию кожных покровов пациента становится очевидно, что у него присутствуют явные проблемы с печенью, и назначается комплекс лабораторных исследований крови, мочи и кала.

Однако многие случаи заражения протекают бессимптомно, без характерной клинической картины. После инкубационного периода, который длиться от пары недель до пары месяцев, пациент может и не подозревать, что он является носителем вируса не только в продромальной (преджелтушной) стадии, но и в желтушной — по причине отсутствия ее как таковой. Например, в 2/3 всех случаев гепатит С проходит в атипичной (безжелтушной, или субклинической) форме.

Что такое анализ ПЦР

Полимеразная цепная реакция – это технология, основанная на умножении количества ДНК вирусов в биоматериале. Для лаборатории берется мазок, соскоб, моча, сперма, кровь. Далее производится многократное клонирование содержащегося в ней генетического материала. За 20-35 таких циклов можно получить материал, достаточный для того, чтобы сравнить его с образцами, соответствующими вирусам, бактериям, грибам и т.д. Если по исследуемому пункту обнаружится совпадение, реакция считается положительной.

По результатам ПЦР можно судить не только о наличии вирусной частицы в организме, о том, к какому генотипу она принадлежит, а также о концентрации возбудителя.

ПЦР на выявление гепатита С играет огромную роль. Этот вирус быстро мутирует, обходит иммунные барьеры, не вызывает классических симптомов инфицирования. Но многих его последствий можно избежать, если обнаружить угрозу на ранней стадии.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования.

Что такое анализ ПЦР

Анализ крови на гепатит С проводится в лаборатории медицинского учреждения или лицензированного предприятия. Это довольно дорогое исследование, кроме того, нет необходимости назначать его всем подряд в целях профилактики. Но есть ряд показаний, при которых ПЦР играет ключевую роль:

  • незащищенный половой контакт с больным;
  • донорство, использование нестерильных шприцев и игл для татуажа, бритвенных и маникюрных принадлежностей, другие формы контакта с кровью зараженного;
  • цирроз печени;
  • положительный ИФА на гепатит;
  • диагностированный гепатит В.

Кровь на ПЦР сдается утром на голодный желудок. Накануне не курите перед сном и не употребляйте алкоголь. Откажитесь от жареной и острой пищи, дайте отдых мышцам. Этих мер вполне достаточно для получения достоверных данных.

Особенности количественного анализа

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

  • вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
  • эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
  • риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
  • риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).
Читайте также:  Диагностика хронических гепатитов, методы лечения и симптомы болезни

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

Показания

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

Особенности количественного анализа
  • положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
  • положительный результат качественной ПЦР;
  • контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Нам каких этапах заболевания проводится

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

  • до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
  • 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
  • последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
  • 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Как проводится количественный ПЦР?

Определение концентрации патогена — суть исследования. Диагностика определяет степень тяжести заболевания, что позволяет полностью увидеть клиническую картину болезни. С помощью это вида ПЦР обнаруживают, какая вирусная нагрузка при гепатите С. После проведения расшифровки полученных данных анализа, врачи назначают лечение, в ходе которого делают забор крови на 4, 12, 16 и 24-й неделях. По завершении 12-й должно быть улучшение, в обратном случае метод лечения стоит заменить.

Современные методы выявления количества вируса

Для определения степени активности вирусного гепатита необходимо подсчитать количество РНК в организме больного. С этой целью выполняют разные виды тестов, отличающихся по степени чувствительности.

При определении количества РНК возбудителя гепатита удается подобрать минимальную терапевтическую дозу, необходимую для уничтожения инфекции.

Методы определения количества возбудителя гепатита С в крови:

  • Количественная ПЦР-диагностика. Тест высокой чувствительности выявляет вирусные РНК в сыворотке крови от 50 МЕ/мл. К нему прибегают несколько раз – до начала терапии, во время приема антивирусных препаратов, после завершения лечения. — рекомендуемый
  • Метод транскрипционной амплификации. Один из самых чувствительных тестов применяется для обнаружения и подсчета количества вирусных частиц. По полученным данным удается выявить минимальную инфекционную нагрузку – до 10 МЕ/мл.
  • Радиоиммунологический анализ. Суть теста заключается в использовании меченых изотопов, которые вступают в реакцию с вирусной частицей. Во время радиометрии подсчитывают количество вирионов в крови.
  • Метод разветвленной ДНК. Сегодня гибридизационный анализ используется крайне редко, что связано с его невысокой чувствительностью – от 500 МЕ/мл. К преимуществам метода относят невысокую стоимость, быстрое получение результатов. Метод разветвленной ДНК используется инфекционистами только при подтвержденном вирусном гепатите С для определения динамики лечения.
  • Способ иммуноблоттинга. Этот тест чувствительнее иммуноферментного анализа. Для определения количества вирионов сначала отделяют плазму от клеток крови. В ходе исследования выявляют не только вирусные частицы, но и антитела к ним. Для выполнения теста нужно от 3 часов до 2 дней.

Для уточнения диагноза определяют генотипы ВГС. В соответствии с результатами теста составляют подходящую схему терапии, оценивают шансы на выздоровление.

В вирусологии зарегистрировано 11 генотипов HCV, которые имеют подтипы. На территории РФ чаще выявляются 1a, 1b и 3b генотипы. В первом случае риск хронизации воспаления и рецидива вирусной инфекции очень высокий. Однако с момента появления на рынке современных противовирусных препаратов первые 6 генотипов вируса поддаются лечению с вероятностью выше 96%, даже при циррозе печени, самые распространенные схемы лечения (ссылка).

Чувствительность определения МЕ/мл —что это значит?

Анализ ПЦР — один из наиболее часто применяемых методов диагностики вирусного гепатита С. При помощи данного анализа можно выявить уровень заражения, а также проверить эффективность проводимой терапии. Благодаря высокой чувствительности теста, погрешность результатов анализа сводится к минимуму.

Но чувствительность определения 60 МЕ/мл — что это значит? Какую роль играет чувствительность теста при диагностике гепатита С и выборе подходящей терапии? Кому необходимо сдавать анализ ПЦР, и как к нему подготовиться? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Об анализе ПЦР

Прежде чем искать ответ на вопрос «Чувствительность определения 60 МЕ/мл — что это значит?», необходимо разобраться с сущностью тестирования, к которому он относится, — анализа ПЦР.

Расшифровывается данная аббревиатура как «полимеразная цепная реакция».

Данное тестирование отличается высоким уровнем реактивной чувствительностью, поэтому широко используется в диагностике вирусного гепатита С.

Полимеразная цепная реакция бывает двух типов:

  • Качественная — проводится с целью обнаружения патогена в крови обследуемого. Анализ рекомендуется как для диагностики болезни, так и для мониторинга его лечения. Положительный результат говорит о наличии вируса в крови больного и о неэффективности лечения, если таковое было. Отрицательный результат чаще всего является следствием отсутствия патогена.
  • Количественная — проводится после установки диагноза с целью определения уровня вирусной нагрузки. Чем выше итоговый показатель, тем серьезнее болен человек.
Читайте также:  Болезнь Боткина и её прямые и скрытые симптомы

Сдать анализ ПЦР можно в любом профильном медицинском учреждении Москвы.

при поддержке исследовательского института индийского фармацевтического производителя Zydus Heptiza. Официальный сайт в России

Кому рекомендуется сдавать ПЦР?

Полимеразная цепная реакция является одним из наиболее точных анализов, позволяющих выявить вирусный гепатит С. Проходить это тестирование рекомендуется следующим группам лиц:

  • Пациентам, у которых наблюдаются характерные для ВГС симптомы
  • Беременным женщинам на любом триместре
  • Больным, регулярно проходящим процедуру диализа
  • Пациентам, недавно пережившим операционное вмешательство
  • Инъекционным наркоманам
  • Посетителям татуажных или маникюрных салонов
  • Медицинским работникам и лаборантам, регулярно контактирующим с инфицированными выделениями
  • Членам семей, в которых проживает зараженный ВГС пациент

Также регулярно сдавать анализы рекомендуется тем, кто уже проходит терапевтический курс и борется с вирусным гепатитом. Это необходимо для отслеживания эффективности лечения.

Как проводится тестирование и как к нему подготовиться?

Любое тестирование требует определенной подготовки, иначе будет нарушена его чувствительность. В частности, перед сдачей анализа ПЦР, пациенту следует:

  • Не употреблять в течение предстоящих 24 часов спиртные напитки и табачную продукцию
  • Отказаться от жирной пищи за несколько суток до явки в лабораторию
  • Ничего не есть в течение последних 8 часов перед сдачей крови

Анализы сдаются в лабораторных условиях в утренние часы. В качестве материала для исследования берется небольшое количество венозной крови пациента. В рамках личной безопасности, обследуемому рекомендуется следить за тем, чтобы используемый медработником шприц был совершенно стерилен.

Кровь из вены пациента берется в незначительном количестве, поэтому на его состоянии процедура никак не сказывается. После сдачи ПЦР пациент может отправляться домой.

О чем говорит порог чувствительности теста?

Итак, ПЦР является очень важным диагностическим тестом. Но его чувствительность определения 60 МЕ/мл — что это значит? Показатели чувствительности определения лабораторного тестирования говорят о том, насколько точно можно определить наличие вируса в крови пациента.

У качественного ПЦР порог чувствительности даже шире — от 10 до 500 МЕ/мл. Такой широкий разброс помогает определить заболевание на любой его стадии. В свою очередь, чувствительность определения количественной полимеразной цепной реакции колеблется в пределах от 50 до 800 000 МЕ/мл. Благодаря этому, можно с точностью определить стадию заболевания и уровень вирусной нагрузки.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для того, чтобы расшифровать анализы, надобно обратиться к таким специалистам — инфекционисту либо гепатологу. Эти доктора смогут расшифровать полученные данные. В основном расшифровка результатов анализа крови, да и вообще любых анализов, для человека без медицинского образования, совершенно непонятны.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

К примеру, при отрицательном тесте на гепатит, и ИФА положительном, смело можно утверждать об отсутствии у пациента НСВ, но это не исключает того, что гепатит С пациент перенес намного раньше, при чем в острой форме.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Считается, что положительный ИФА говорит, о том, что в кровяном русле обнаружены антитела, произведенные после того, как вирус был в прошлом поражен. Однако в нынешней медицине этот анализ не считают достаточно надежным. Доктора его используют исключительно в качестве первичного скрининга. При диагностике болезни доктора отталкиваются от показателей ПЦР-тестов.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Чтобы сделать анализ ПЦР используется кровь из вены. Обычно делают двойной забор биоматериала — для теста ПЦР и для ИФА. Чтобы результаты были точными и достоверными, нужно соблюдать некоторые правила забора биоматериала:

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?
  • между употреблением еды и забором биоматериала должен быть выдержан временной промежуток — не меньше 8 часов;
  • кровь нужно сдавать на голодный желудок, в первой половине дня;
  • на протяжении суток перед анализом нужно отказаться от интенсивных физнагрузок;
  • перед тем, как сдавать анализ, надобно отказаться от употребления жареной еды и от питья спиртного.
Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Готовые результаты можно забрать на следующий день.

Поделиться с друзьями:

Когда и кому необходимо сдавать количественный ПЦР на гепатит С?

Терапия любого заболевания допустима только после установления точного диагноза. Врач сбирает анамнез, оценивает клинические проявления недомогания, а также назначает дополнительные лабораторные обследования.

Это интересно: Что значит отрицательный Анти-HCV?

Прежде чем доктор поставит диагноз, подберёт лечение, необходимо количественное определение РНК вируса гепатита С. Этот анализ назначается не всем пациентам, а при конкретных показаниях:

  • контакт с больным гепатитом С;
  • симптомы заболевания печени;
  • клинические проявления цирроза;
  • в биохимическом анализе крови показатели активности АЛТ, АСТ выше нормы;
  • подозрение на инфицирование гепатитом С;
  • выявлены антитела к HCV при иммуноферментном исследовании крови;
  • уточнение диагноза;
  • определение вирусной нагрузки, чтобы доктор мог выбрать тактику, правильно составить схему лечения;
  • контроль эффективности проводимой терапии в динамике (1, 4, 12, 24 недели после начала лечения);
  • динамика протекания заболевания;
  • при подозрении на смешанные поражения железы;
  • по окончании лечения гепатита для периодической проверки, чтобы исключить рецидив.
IQ медицина - лечимся с умом